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20.（12分)氮是植物生长发育不可缺少的元素之一，提高植物对氮元素的利用效率有利于农业的可持续发展和环境保护。(1)植物从土壤中吸收硝酸盐，可用于在细胞中生成等含氮的生物大分子。不同浓度的硝酸盐能够诱导相关基因表达，从而调控自身代谢和生长，可知硝酸盐也是调节植物生命活动的30(2)CHL1是植物细胞膜上的硝酸盐转运蛋白，NLP是硝酸盐受体，NLP发生磷酸化后会与硝酸盐响应基因的启动子结920合激活转录。研究人员将上述两种蛋白功能缺失突变体10ch1和nlp与野生型(WT)拟南芥种子分别栽种在含硝酸0盐的培养基中，检测幼苗生长情况，结果如图1。实验结果WT chll nlp图1显示,推测NLP发挥更主要的作用。(3)为检验NLP的N端与C端区域的功能，进行了蛋白质截断实验。实验方案及结果如图2所示，利用报告基因分别与6组不同类型的目的基因制备转基因拟南芥，分别置于含KCl或KNO3的培养基中培养。报告基因：一a☐编码N端编码C端801组：1▣KCI2组：→型60口KNO:583组：404组：→☑证208785组：581564R76组：→对照1组2组3组4组5组6组563582959〉启动子☐终止子日□硝酸盐响应基因中激活四荧光素酶基因☐NZP基因☑L基因启动子的结合区战注：N端代表蛋白质氨基端，C端代表蛋白质羧基端，数字代表碱基序列位点。L蛋白功能与NLP相似，N端钻构与NLP差异校大。图2根据实验结果可以得出的结论是(4)研究者推测硝酸盐结合NLP后会引起空间结构改变，使N端与C端相互结合后发挥功能。为直观了解硝酸盐对NLP的作用，将黄色荧光蛋白基因m分为两部分，分别连接到,利用改造的基因制备转基因拟南芥，分别置于含KC1或KNO3的培养基钙离子QQ硝酸盐中培养，实验在5分钟即可观察到,证实钙离子通道CHL1细胞膜推测成立。o(5)已有研究显示，当环境中存在硝酸盐时野生型拟南芥细胞内Ca2+浓度会迅速提高，而突变体chl1N端与C端N端与C崂结合的NLP未结合的NLP无此现象，当用钙离子通道阻滞剂处理细胞后，响应硝酸盐的基因表达被显著抑制，去除细胞中的酸化转录细胞核Ca2+,磷酸化的NLP含量下降。综合上述实验的NLPD网硝酸盐响应基因结果，在图3中用箭头表示出植物感受硝酸盐后的信号作用途径。图3